因此，在暗场照明发生了甚么事是所有通常不偏离的零阶射线不透明站已被封锁。斜射线衍射试样，得到第一，第二，和更高衍射级的物镜，请他们与试样以产生图像干扰到成像面的后侧焦点面。

　　暗场照明的理想人选包含分钟的水生生物，微生物，硅藻，小昆虫，骨，纤维，头发，未染色的细菌，酵母，细胞构造培养，和原生动物。非生物标本包含矿物和化学晶体，胶体颗粒，灰尘计数标本，而薄的片面聚合物和陶瓷含有微细的夹杂物，孔隙度的差异，或折射率梯度。筹办BX53M金相显微镜标本时，应谨慎，BX53M金相显微镜因为躺在焦点平面的上方和下方的功能也可以散射亮光，有助于图像退化。用试样的厚度和显微镜载片上的厚度也短长常重要的，在一般环境下，薄的试样衍射工件，可以干扰图像形成期望消除的可能性。